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分享卵巢癌耐藥細胞生長情況實驗的具體步驟
更新時間:2021-04-27 點擊次數:1178次
  所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全台內操作,並請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌後方能丟棄。收到細胞後,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個卵巢癌耐藥細胞生長情況。
 
  (一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒後放到超菌台內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,換10ml新鮮培養液後繼續培養。
 
  (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
 
  1.棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
 
  2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)於培養瓶中,倒放於37℃培養箱1-3分鍾預熱,之後翻轉培養瓶10-30秒後,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養瓶後加少量*培養基終止消化。
 
  3.按6-8ml/瓶補加*培養基,輕輕打勻後吸出一半,分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞後的*次傳代一般是一傳二。
 
  卵巢癌耐藥細胞注意事項:
 
  1、觀察細胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。
 
  2、瓶中運輸培養基不能重複再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存後,培養基中可不加任何抗生素。
 
  3、有些細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打後接種到新瓶內。
 
  4、收到細胞後,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有汙染,請及時與91精品国产麻豆国产自产在线。
 
  卵巢癌耐藥細胞的安全性:所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全台內操作,並請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌後方能丟棄。收到細胞後,在倒置鏡下(4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
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